CUENTA DE PLAQUETAS CON CÁMARA DE NEUBAUER
Realizar e interpretar la
técnica para la cuenta de trombocitos o plaquetas en la cámara de Neubauer.
FUNDAMENTO
Los trombocitos o plaquetas
constituyen una parte esencial del organismo hemostático del cuerpo. Son
cuerpecillos hialinos incoloros que miden de 2-4 μ, de bordes irregulares, pero
pueden tener forma esférica u ovalada, carecen de núcleo y son muy frágiles.
Provienen de una célula gigante que mide de entre 50-100 μ de diámetro llamada
megacariocito.
Una de las principales
funciones de las plaquetas es participar en los mecanismos de la hemostasia
(Hemos=sangre, stasis=detención) adhiriéndose entre ellas y a las paredes de
los vasos sanguíneos lesionados, para formar así el trombo plaquetario o tapón
hemostático.
El líquido diluyente puede
ser una solución estéril de p-aminobenzoato de dietilaminoetilo (85 milimolar)
y cloruro de sodio (31 milimolar). Este líquido se provee listo para usar y su
conservación es indefinida en refrigerador (2 - 10° C) o puede ser también
oxalato de amonio al 1%. El fundamento del método consiste en la producción de
hemólisis por la utilización de un líquido hipotónico, y el mantenimiento de
las plaquetas intactas y sin agrumar por la presencia de p-aminobenzoato de
dietilaminoetilo.
MATERIALPipeta de Thoma para glóbulos rojos (perla roja)
Equipo para venopuncion (Tubo lila)
Boquilla roja
Tubo de goma
Tubos de ensayo
Papel parafilm
Cámara de Neubauer
Cubrehematimetro
Microscopio
Gasas
Caja de Petri
Papel filtro
SUSTANCIAS
Alcohol al 70%Sangre venosa
Diluyente de plaquetas
PROCEDIMIENTO
1. Obtener 10 ml de sangre
venosa, en un tubo con anticoagulante EDTA
2. Agitar la sangre de
manera suave en el tubo para mezclarla con el anticoagulante
3. Llevar la sangre hasta la
marca 1.0 de la pipeta de Thoma. Limpiar la punta con una gasa
4. Aforar con liquido
diluyente de plaquetas hasta la marca 101 de la pipeta (Dilución 1:100)
5. Tapar los extremos con
papel parafilm y mezclar durante 1 minuto
6. Colocar la Cámara de
Neubauer sobre una superficie horizontal y poner el cubrehematímetro sobre las
mesetas
7. Descartar las primeras 4
gotas de la pipeta. Con la quinta gota cargar la cámara, depositándola entre la
meseta y el cubrehematímetro y dejarla difundir por capilaridad, teniendo
cuidado de que no se formen burbujas o se derrame el líquido hacia los surcos
10. El cuadro central de la
cuadricula mide 1.0 mm por lado y está dividido en 16 cuadritos más pequeños,
de tal manera que el número total de estos últimos es de 400, mismos en los que
se lleva a cabo el recuento de plaquetas.
OBSERVACIONES
Enfocando la cuadricula
central se aprecian los 25 cuadros centrales, con una gran cantidad de
plaquetas en ellos. Se pueden distinguir solo algunos eritrocitos, mucho
mayores que las plaquetas, que desprenden gran brillo
Cámara de Neubauer, 40x
Uno de los cuadros
centrales, lleno de plaquetas, de forma redonda la mayoría u ovalada.
RESULTADOS
Los recuentos de plaquetas,
al igual que los eritrocitos y leucocitos, se expresan como concentraciones,
que en este caso serían número de células por unidad de volumen de sangre, que
es 1mm3
Después de contar las plaquetas
presentes en los 400 cuadritos centrales, el número obtenido se multiplica por
el factor de dilución de la siguiente manera:
N° de plaquetas x mm3 = No.
De plaquetas contadas X dilución X 10
Dilución: 1:100
Este factor corresponde,
para obtener los resultados por mm3 ya que el volumen de la cámara es de 0.1
mm3
El número de plaquetas fue
de 535, por lo que al realizar los cálculos quedaron así:
No. de plaquetas = 535 X 100
X 10= 535 000 plaquetas por mm3, lo que indica un índice elevado de plaquetas.
VALORES DE REFERENCIA
(Millones de células/mm3)
Hombres y
Mujeres:………………………………..150 000 - 450 000
CONCLUSIÓN
El recuento de plaquetas es
de suma importancia y es parte del recuento celular de la sangre como prueba de
rutina.
El paciente con un trastorno
hemorrágico, clínicamente significativo, acude al médico con algunos tipos de
síntomas hemorrágicos, con lo que se puede indicar la parte defectuosa del
mecanismo de coagulación, y dentro de estas causas pueden estar la cantidad
inadecuada de plaquetas.La hemorragia de vasos sanguíneos subcutáneos en piel intacta se puede ver como petequias o equimosis. Cuando se encuentran equimosis en gran cantidad y sin traumatismo aparente, el trastorno se conoce como Diátesis Hemorrágica y puede ser producida por anormalidades en los vasos sanguíneos, por la disminución en el número de plaquetas o por el mal funcionamiento.
La disminución de plaquetas se denomina Trombopenia o púrpura trombocitopénica y se debe a lo siguiente:
Bibliografía:
• Fundamentos y técnicas de
análisis hematológicos y citológicos, articulo web consultado el día 8 de marzo
de 2012 en:
http://html.rincondelvago.com/fundamentos-y-tecnicas-de-analisis-hematologicos-y-citologicos.html
• Recuento de plaquetas,
artículo consultado el día 23 de marzo en http://www.americalab.net/acerca-de-las-pruebas/recuento-de-plaquetas.html
• Martínez Fragoso, Vicente.
Manual de Biometría Hemática. CBTis199, México, 2012. Pp. 30-32
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